酥瓜ISSR-PCR反应体系建立与优化  

承刚
作者    通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2016 年, 第 14 卷, 第 0 篇   
收稿日期: 1970年01月01日    接受日期: 1970年01月01日
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摘要
利用正交设计L16(45),对酥瓜ISSR-PCR反应体系的5个因素(dNTPs、引物、Mg2+Taq DNA聚合酶、模板DNA)在4个水平上进行优化试验,并在 36 ℃~56 ℃范围内摸索退火温度,建立适合酥瓜ISSR-PCR反应体系,结果表明,在20 µL反应体系中,含有Mg2+ 1.0 mmol/L、dNTPs 0.3 mmol/L、Taq DNA聚合酶 1.2 U、引物 0.2 μmol/L、DNA 模板70 ng、10×Buffer 2.0 µL为最佳反应体系,退火温度为 52.5 ℃。该体系为酥瓜种质资源的遗传多样性分析评价奠定基础。
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