艺萍 , 继华 , 素萍 , 秀梅 , 璐琳 , 凤 , 月秋

1云南农业大学, 昆明, 650205;
2云南省农业科学院花卉研究所, 国家观赏园艺工程研究中心, 云南省花卉育种重点实验室, 云南省花卉工程技术研究中心, 昆明, 650205
作者    通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2016 年, 第 14 卷, 第 34 篇   
收稿日期: 2016年04月07日    接受日期: 2016年04月19日    发表日期: 2016年07月21日

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本研究以百合组培苗叶片为试验材料，研究不同蛋白提取方法的得率、电泳上样量及聚焦除盐时间对双向电泳图谱的影响。结果表明：采用三氯乙酸(TCA)/丙酮沉淀法提取百合叶片蛋白质比Tris-HCl法效果好，蛋白得率为38.5 mg/g，且颜色较白，获得的2-DE图谱较好；上样量为600 µg时得到的图谱分辨率高、蛋白斑点分布均匀、清晰；等电聚焦(Iso-electrofocusing, IEF)中的2个除盐步骤的时间分别为2 h和2.5 h时，可以较好地去除盐分，顺利完成聚焦并得到较好的双向电泳图谱。该体系的建立将为下一步百合蛋白质组学研究及利用分子育种技术培育抗病品种提供技术资料。

百合；总蛋白提取；双向电泳