田莉莉^* , 牛良

中国农业科学院郑州果树研究所, 河南省果树瓜类生物学重点实验室, 农业部果树育种技术重点实验室, 郑州, 450009
作者    通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2016 年, 第 14 卷, 第 10 篇   
收稿日期: 2015年08月30日    接受日期: 2015年12月28日    发表日期: 2016年01月11日

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病毒病对世界葡萄生产危害严重。为创制广谱抗病毒植物新材料，本研究采用RT-PCR分别克隆获得了葡萄扇叶病毒、葡萄卷叶病毒、葡萄病毒A和葡萄病毒B的外壳蛋白基因保守片段，用重叠延伸PCR方法串联获得了825 bp的大片段“GV”，以此串联基因片段用作干扰片段，采用Gateway技术构建了同时含有4种病毒CP基因片段的RNAi植物表达载体“Ph12-GV”，冻融交替法将其转入农杆菌菌株EHA105中。采用根癌农杆菌介导法遗传转化“红宝石无核”葡萄合子胚诱导发生的体细胞胚，RT-PCR的检测结果显示，目的基因片段成功转入葡萄中并在RNA水平上得到表达。

葡萄；抗病毒；RNAi载体；体细胞胚；遗传转化