张平平 , 周淼平 , 马鸿翔

江苏省农业科学院/江苏省农业生物学重点实验室/江苏省现代作物生产协同创新中心, 南京, 210014
作者    通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2015 年, 第 13 卷, 第 8 篇   
收稿日期: 2015年08月13日    接受日期: 2015年09月09日    发表日期: 2015年11月25日

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为建立小麦种子高分子量麦谷蛋白亚基(HMW-GS)高通量检测方法，本研究改进了传统聚丙烯酰氨凝胶电泳(SDS-PAGE)中的样品制备和电泳分析方法，提高了检测效率。具体方法为：在小麦种子无胚端切取其体积的1/4~1/5，置于单孔容积为200 μL的96孔PCR扩增板中，并在每个微孔中放入1粒直径2 mm的钢珠，并加入浸泡缓冲液静置1~2 h，再加入提取缓冲液，经高通量研磨器(Retsch Tissue Lyser)研磨后，在60℃的烘箱静置30 min。对微孔板离心和上清液预处理后在DYCZ-30C高通量垂直版电泳槽进行电泳分离，获得清晰的HMW-GS分离图谱。该方法简易、快速、成本低，适用于小麦标记辅助选择和资源评价中的大规模HMW-GS组成的检测。

小麦；高分子量谷蛋白亚基；高通量检测