长江大学生命科学学院, 荆州, 434025
作者 通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2015 年, 第 13 卷, 第 24 篇
收稿日期: 2015年05月19日 接受日期: 2015年06月13日 发表日期: 2015年08月29日
作者 通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2015 年, 第 13 卷, 第 24 篇
收稿日期: 2015年05月19日 接受日期: 2015年06月13日 发表日期: 2015年08月29日
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推荐引用:
Du H.W., Huang M., and He K., 2015, A method of rapid isolation of total RNA from mature seeds in rice, maize, and wheat, Fenzi Zhiwu Yuzhong (Molecular Plant Breeding), 13(9): 2091-2094 (杜何为, 黄敏, 何凯, 2015, 水稻、玉米、小麦成熟种子总RNA的快速提取, 分子植物育种, 13(9): 2091-2094)
摘要
本研究以水稻、玉米、小麦的成熟种子为试验材料,使用液氮分别进行研磨,研磨后的样品先用10% SDS和50 mmol/L Tris-HCl处理,再使用TRIzol试剂盒提取,并将提取的总RNA分别进行了电泳、浓度测定、反转录与Real-time PCR分析。结果显示:18S rRNA和28S rRNA条带清晰;A260/A280比值介于1.95~2.08之间;小麦的得率高于200 μg/g,水稻的得率高于300 μg/g,而玉米的得率低于230 μg/g。Real-time PCR结果表明:0.1 μmol/L或10 μmol/L GA处理后,水稻种子中SLRL1基因的表达水平显著升高。研究结果表明,本方法提取的水稻、玉米、小麦成熟种子总RNA质量较好,能满足成熟种子中基因表达的检测。
关键词
RNA;提取;成熟种子;水稻;玉米;小麦
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