谢玉明^1,2 , 李益^1,2 , 严佳文^1,2 , 姚润贤^1,2 , 邓子牛^1,2

1湖南农业大学园艺园林学院, 长沙, 410128;
2国家柑橘改良中心长沙分中心, 长沙, 410128
作者    通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2015 年, 第 13 卷, 第 16 篇   
收稿日期: 2015年05月06日    接受日期: 2015年05月19日    发表日期: 2015年10月15日

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利用“外源基因清除”技术(‘Gene-Deletor’)，将外源基因从转基因金柑果实中彻底清除，达到用转基因作物生产出非转基因食品的目的。本研究利用引物pE8F和pE8R从樱桃番茄中克隆果实特异启动子E8，通过Sal I和Sma I双酶切置换掉“外源基因清除”载体(pCambia-LF-polseed-FLP, 简称: Y-A)中的花粉、种子特异启动子PAB5，重新构造“外源基因清除”载体Y-A-E8，利用农杆菌EHA105介导转化实生态金柑，获得转化植株，并通过nptⅡ基因特异引物nptⅡ-F和nptⅡ-R PCR检测阳性转化植株。载体Y-A-E8 Sal I和Sma I双酶切结果表明，E8启动子成功替换启动子PAB5，Y-A-E8经EHA105介导转化成功获得11株转化植株且PCR检测到6株为Y-A-E8转基因植株，研究结果可为“外源基因清除”技术在转基因金柑方面的应用提供参考。

“外源基因清除”技术；果实特异启动子E8；载体改造；金柑；遗传转化