付营¹ , 辛大伟¹ , 刘洋¹ , 王锦辉¹ , 李长育¹ , 刘丽敏¹ , 于仁敬¹ , 尹燕斌¹ , 谷月¹ , 邱海阳¹ , 王雅楠¹ , 刘春燕² , 陈庆山¹

1.东北农业大学农学院，黑龙江省哈尔滨市150030；
2.黑龙江省农垦科研育种中心，黑龙江省哈尔滨150090
作者    通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2015 年, 第 13 卷, 第 7 篇   doi: 10.13271/j.mpb.013.001719
收稿日期: 2015年04月22日    接受日期: 2015年05月17日    发表日期: 2015年06月19日

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推荐引用：

Fu Y., Xin D.W., Liu Y., Wang J.H., Li C.Y., Liu L.M., Yu R.J., Yin Y.B., Gu Y., Qiu H.Y., Wang Y.N., Liu C.Y., and Chen Q.S., 2015, Procedure improvement for mutating coding genes of type Ⅲ effector in Sinorhizobium fredii HH103, Fenzi Zhiwu Yuzhong (Molecular Plant Breeding), 13(8): 1719-1724 (付营, 辛大伟, 刘洋, 王锦辉, 李长育, 刘丽敏, 于仁敬, 尹燕斌, 谷月, 邱海阳, 王雅楠, 刘春燕, 陈庆山, 2015, 根瘤菌HH103Ⅲ型效应因子编码基因的突变方法改进, 分子植物育种，13(8): 1719-1724)

突变基因的编码序列是研究基因功能的一个有效途径。三亲杂交是利用细菌结合的特性使外源DNA进入受体细胞，通过外源DNA与基因组目标序列发生同源重组，进而实现突变目标基因的有效方法。本研究通过分析同源臂的长度和混合菌比例，明确其对三亲杂交效率的影响。以根瘤菌HH103的Ⅲ型效应因子编码基因nopB、nopC、nopL为例，对混合菌(根瘤菌, 帮助菌株, 供体菌株)的比例和同源臂的长度设置了不同的梯度组合，探讨根瘤菌Ⅲ型效应因子突变的高效方法。结果显示，左右同源臂的长度为521 bp、861 bp时和三种菌混合的比例为2:1:1的因素组合，是突变目标基因最高效的组合方法。本研究所改进方法可为根瘤菌及其它革兰氏阴性菌的基因高效突变研究提供参考。

根瘤菌HH103；III型效应因子编码基因；三亲杂交；同源臂长度；混合菌比例