2中国热带农业科学院热带生物技术研究所, 农业部热带作物生物学与遗传资源利用重点实验室, 海口, 571101;
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《分子植物育种》印刷版, 2015 年, 第 13 卷, 第 10 篇 doi: 10.13271/j.mpb.013.001027
收稿日期: 2015年03月30日 接受日期: 2015年04月18日 发表日期: 2015年05月12日
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Fan J., Wang Y.Q., Li R.M., Zhang F., Duan R..J., Fu S.P., Liu J., Hu X.W., and Guo J.C., 2015,Expression of recombinant galactinol synthase of manihot esculenta crantz in escherichia coli, Fenzi Zhiwu Yuzhong (Molecular Plant Breeding),13(5): 1027-1032(范洁,王雨晴,李瑞梅,张帆,段瑞军,符少萍,刘姣,胡新文,郭建春,2015,木薯中肌醇半乳糖苷合成酶基因在大肠杆菌中的表达,分子植物育种,13(5): 1027-1032)
本研究利用从木薯中克隆到的肌醇半乳糖苷合成酶基因构建到高效表达载体pGEX-6p-1上,构建重组载体MeGolS5-pGEX,并对GST-MeGolS5融合表达的IPTG诱导浓度、诱导不同温度、不同菌液浓度和诱导时间等条件进行优化。研究结果表明:随诱导时间增长GST-MeGolS5融合蛋白表达量提高,在37℃时,OD600为0.4左右,诱导4 h MeGolS5-GST融合蛋白的表达量达到最大,在0.2 mmol/L IPTG浓度下,可以有效诱导MeGolS5-GST融合蛋白的表达;MeGolS5重组菌株可以耐受5%的PEG6000模拟的干旱胁迫。本研究结果可为解析MeGolS5基因的功能以及在木薯抗旱过程中的作用机理提供参考。