张列^1,2 , 庹德财^1,2 , 沈文涛² , 周鹏^1,2,3

1海南大学农学院, 海口, 570228;
2中国热带农业科学院热带生物技术研究所, 海口, 571101;
3中国热带农业科学院分析测试中心, 海口, 571101
作者    通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2015 年, 第 13 卷, 第 16 篇   doi: 10.13271/j.mpb.013.001067
收稿日期: 2015年02月27日    接受日期: 2015年03月10日    发表日期: 2015年03月29日

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推荐引用：

Zhang L., Tuo D.C., Shen W.T., anf Zhou P., 2015, Expression and activity analysis of papaya methionine sulfoxide reductase B1 (PaMsrB1) in pichia pastoris, Fenzi Zhiwu Yuzhong (Molecular Plant Breeding), 13(5): 1067-1071 (张列，庹德财，沈文涛，周鹏，2015，番木瓜蛋氨酸亚砜还原酶B1(PaMsrB1)的真核表达及其活性检测，分子植物育种，13(5): 1067-1071 ）

在生物和非生物逆境下，植物蛋氨酸亚砜还原酶B1 (methionine sulfoxide reductase B1, MsrB1)具有修复叶绿体中被氧化蛋白的功能。本研究首次利用毕赤酵母真核表达系统，胞外分泌表达了番木瓜MsrB1 (PaMsrB1)重组蛋白，并通过Ni2+-NTA-琼脂糖亲和层析柱获得了纯化蛋白。Western blot结果显示，在预期大小(22.7 kD)出现特异性条带，表明表达纯化的蛋白为PaMsrB1重组蛋白。通过H2O2氧化胁迫和薄层层析实验，从体内和体外证明了获得的重组PaMsrB1具有抗氧化能力和还原酶活性。研究结果可为进一步研究PaMsrB1在番木瓜叶绿体中抗氧化机制奠定了基础。

PaMsrB1重组蛋白；表达纯化；抗H2O2氧化； 薄层层析