王建勇 , 谭晓风 , 曾艳玲 , 龙洪旭 , 陈鸿鹏 , 刘凯 , 梅芳芳

1中南林业科技大学, 经济林培育与保护教育部重点实验室, 经济林育种与栽培国家林业局重点实验室, 长沙, 410004; 2国家林业局桉树研究开发中心, 湛江, 524022; 3广西林业科学研究院, 南宁, 530001; 4华中师范大学生命科学学院, 武汉, 430079
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《分子植物育种》印刷版, 2016 年, 第 14 卷, 第 24 篇   
收稿日期: 2016年03月14日    接受日期: 2016年03月31日    发表日期: 2016年06月01日

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油茶是我国重要的木本食用油料树种，在油茶种子的发育过程中，涉及到一系列调控代谢过程的酶和基因，脂肪酸β氧化多功能蛋白(MFP)是β氧化系统上的一类酶，它完成催化β-氧化途径中的水合与脱氢过程。本研究以国审油茶品种‘华硕’种子为材料，在已构建的转录组和表达谱数据库的基础之上，采用RACE技术，克隆到油茶脂肪酸β氧化多功能蛋白基因的cDNA全长序列，命名为CoMFP (GenBank登录号为KJ910342)。序列分析表明，该基因cDNA全长为2 541 bp，含有2 178 bp的开放读码框，编码725个氨基酸，分子量为79.033 3 kDa，理论等电点pI为9.11，具有六个比较明显的跨膜区，不仅存有反式烯酰CoA水合酶(ECH)信号序列、3羟酰CoA脱氢酶(HCDH)信号序列、ECH基序和磷酸结合基序，也具有相当保守的盐桥，活性位点及五个亚结构域，成功地构建了原核表达载体并在宿主细胞BL21 (DE3)上成功诱导表达，获得表观分子量约为79 kDa的相应目的蛋白。

油茶；多功能蛋白；克隆；载体构建；原核表达