黎忠杰 , 陶怡 , 黄璐 , 杨洁 , 吴拥军上标^*

贵州大学生命科学学院,农业生物工程研究院,山地植物资源保护与保护种质创新教育部重点实验室,山地生态与农业生物工程协同创新中心,贵阳, 550025
作者    通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2021 年, 第 19 卷, 第 9 篇   
收稿日期: 2021年09月12日    接受日期: 2021年10月27日    发表日期: 2022年09月23日

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为了获得一定纯度的 NtLBM1蛋白，本研究通过 RT-PCR从野生型烟草叶片中扩增得到NtLBM1cDNA序列。生物信息学分析表明，NtLBM1 全长 1 459 bp，开放阅读框为 846 bp，编码 281个氨基酸，含 1个 SANT保守结构域；构建 pET30a-NtLBM1 原核表达载体，并转化到E. coli BL21 (DE3)中，NtLBM1蛋白以包涵体形式存在，包涵体蛋白经 8 mol/L尿素溶解后，采用 Q Sepharose FF离子交换层析和 Ni-IDA亲和层析洗脱纯化，4℃透析后置于 2 mol/L尿素缓冲液中复性，最终获得浓度为 0.390 mg/mL、纯度 90%以上的 NtLBM1蛋白。目的蛋白的成功表达为进一步研究 NtLBM1蛋白的互作及其对植物生长发育的调控机
制提供了理论参考和数据支持。
 

NtLBM；原核表达；蛋白纯化