崔明珠 , 李云玲 , 田保明 , 李瑞 , 郝志达 , 位芳

郑州大学生命科学学院, 郑州, 450001
作者    通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2015 年, 第 13 卷, 第 11 篇   doi: 10.13271/j.mpb.013.000781
收稿日期: 2014年09月25日    接受日期: 2014年11月03日    发表日期: 2014年12月24日

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本研究以日龄1~3 d及7 d的小麦幼胚为受体，利用携带GUS基因的农杆菌LBA4404侵染，恢复培养至3~5叶期时，取第三叶进行GUS组织化学染色分析；并做两个优化对比处理：(1)抽真空处理：在侵染过程中，0.1 MPa抽真空2 min；(2)干燥处理：在共培养阶段，将幼胚转入铺有干燥无菌滤纸的平皿中。结果表明：GUS瞬时表达率随日龄增加而降低，以2~3 d龄的幼胚为最高；抽真空和干燥处理均能显著提高GUS瞬时表达率。最终，在优化处理条件下，获得77株转化苗中，40株第三叶GUS染色显示阳性，高达57.14%。进一步提取GUS阳性小麦叶片基因组DNA，进行PCR扩增，有6株转化苗扩增出目的条带，转化率为7.79%。初步说明以小麦幼胚的生长点作为转化受体是可行的。

小麦；幼胚；生长点转化；抽真空；干燥