郭文雅^1,2 , 王海³ , 王亚杰^1,2 , 张彤¹ , 姚远² , 郭建春² , 耿梦婷¹ , 陈银华¹

作者    通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2022 年, 第 20 卷, 第 18 篇   
收稿日期: 2021年03月18日    接受日期: 2021年04月03日    发表日期: 2022年09月15日

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植物 WRKY转录因子可参与植物对重金属离子的胁迫响应过程，木薯 MeWRKY 12 基因表达受到镉(Cd)、铅(Pb)离子胁迫诱导。本研究利用在线软件 CRISPR-P v2.0 设计了 MeWRKY 12 基因的编辑靶点，构建 CRISPR/Cas9 基因编辑载体 pCAMBIA1301-Cas9-MeWRKY 12-sgRNA，并将该载体转化、侵染木薯脆性胚性愈伤组织。PCR 扩增基因靶点及潜在的脱靶位点区域序列，并进行 Sanger 测序分析序列变化情况。结果表明，MeWRKY 12 基因被成功编辑，且没有脱靶现象。本研究有助于进一步获得 MeWRKY 12 基因突变体，为解析 MeWRKY 12 转录因子调控木薯响应 Cd、Pb 胁迫的分子机理打下基础。

CRISPR/Cas9；木薯；MeWRKY 12 基因