研究报告/Research Report

甘蓝型油菜下胚轴一步不定芽再生培养及遗传转化应用  

廖志强1,2 , 邬贤梦1 , 孙娟1 , 官春云1
1 湖南农业大学油料作物研究所, 长沙, 410128;
2 江西省宜春市农业科学研究所, 宜春, 336000
作者    通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2015 年, 第 13 卷, 第 13 篇   doi: 10.13271/j.mpb.013.000793
收稿日期: 2014年09月05日    接受日期: 2014年10月17日    发表日期: 2014年12月17日
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摘要

本研究建立了以甘蓝型油菜下胚轴为外植体的一步不定芽再生培养和遗传转化体系。首先,以甘蓝型油菜中双11号含部分子叶节的下胚轴为外植体,从6-BA和NAA配比、AgNO3以及无菌苗苗龄等方面对影响油菜组织培养的因素进行了研究,建立了甘蓝型油菜快速高频一步不定芽再生培养技术体系。该技术体系为,切取5 d苗龄含部分子叶节的下胚轴置于添加4 mg/L 6-BA的MS基本培养基中培养,5 d再生出不定芽,再生频率为100%。在此基础上,进行了甘蓝型油菜的遗传转化,成功地将用pFGC5941双元载体构建的BnTFL1基因干扰载体转入中双11号中。整个转化过程中,芽的诱导生成只需5 d,接着完成抗性芽的PPT筛选需要30 d,整个转化周期从播种到得到生根抗性苗仅需大约70 d,而传统转化方法抗性芽的诱导筛选需要90 d,整个转化周期需要130 d左右,大大缩短了转化周期,简化了转化过程,提高了转化效率。

关键词
油菜;下胚轴;子叶节;一步再生培养;遗传转化

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《分子植物育种》印刷版
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