曾学蔚 , 袁红梅

海南大学热带作物学院, 海南省热带生物资源可持续利用重点实验室, 海口, 570228
作者    通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2022 年, 第 20 卷, 第 20 篇   
收稿日期: 2021年03月03日    接受日期: 2021年03月18日    发表日期: 2022年04月28日

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以橡胶草为实验材料，研究不同消毒处理对橡胶草叶片和种子的影响及农杆菌共培养时间对外植体成活率、再生芽诱导、转化效率的影响，优化了橡胶草遗传转化体系并获得HbEIN3-1转基因橡胶草植株。结果表明：对橡胶草种子进行消毒的效果整体优于对橡胶草叶片进行消毒的效果，以经70% 乙醇 40s+20% Naclo 10 min消毒的橡胶草种子生长出的无菌苗叶片作为外植体利于遗传转化。随着农杆菌共培养时间延长，会提高橡胶草愈伤组织的褐化率，降低成活率，减少分化芽数量，但转化效率会有提升，综合比较，农杆菌共培养时间为3天最佳。通过该体系将橡胶树产胶关键基因HbEIN3-1转化到橡胶草中，经Basta抗性筛选和PCR鉴定，成功获得HbEIN3-1转基因橡胶草植株，阳性率为71.4%，转化率为70.6%。该研究为橡胶草高效遗传转化体系的建立及橡胶树HbEIN3-1功能研究提供实验基础。

以橡胶草为实验材料，研究不同消毒处理对橡胶草叶片和种子的影响及农杆菌共培养时间对外植体成活率、再生芽诱导、转化效率的影响，优化了橡胶草遗传转化体系并获得HbEIN3-1转基因橡胶草植株。结果表明：对橡胶草种子进行消毒的效果整体优于对橡胶草叶片进行消毒的效果，以经70% 乙醇 40s+20% Naclo 10 min消毒的橡胶草种子生长出的无菌苗叶片作为外植体利于遗传转化。随着农杆菌共培养时间延长，会提高橡胶草愈伤组织的褐化率，降低成活率，减少分化芽数量，但转化效率会有提升，综合比较，农杆菌共培养时间为3天最佳。通过该体系将橡胶树产胶关键基因HbEIN3-1转化到橡胶草中，经Basta抗性筛选和PCR鉴定，成功获得HbEIN3-1转基因橡胶草植株，阳性率为71.4%，转化率为70.6%。该研究为橡胶草高效遗传转化体系的建立及橡胶树HbEIN3-1功能研究提供实验基础

 

橡胶草(Taraxacum kok-saghyz Rodin)；组织培养；外植体；遗传转化