刘新梅^1,2 , 梁慧珍^2* , 许兰杰² , 余永亮² , 杨红旗² , 谭政委² , 董薇² , 李磊² , 肖爱利³

1 郑州大学生命科学学院, 郑州, 450002; 2 河南省农业科学院芝麻研究中心, 郑州, 450002; 3 河南省农业技术推广总站, 郑州, 450002
作者    通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2022 年, 第 20 卷, 第 26 篇   
收稿日期: 2020年11月13日    接受日期: 2020年11月20日    发表日期: 2022年08月03日

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为构建红花最佳扩增体系，为以后研究红花遗传多样性和目的基因标记提供了科学依据。本研究采用 L₁₆(4⁵)正交试验和单因素试验相结合的方法对红花 SCoT-PCR 反应体系中的引物，DNA、dNTPs、PCR Buffer (含 Mg²⁺)、Taq DNA 聚合酶进行优化，每个因素都设为四水平。结果表明，五个影响因素中 dNTPs 的影响最大，红花最佳反应体系为引物 0.6 mmol/L，DNA 60 ng，dNTPs 0.25 mmol/L，Taq DNA 聚合酶 1.5 U，PCR Buffer (含 Mg²⁺) 2 μL，ddH₂O 补足至 20 μL。选用引物 S15 对八种红花资源对扩增体系进行验证，结果显示扩增条带清晰，多态性好，表明该体系适合红花分子标记研究。

SCoT；体系优化；红花(Carthamus tinctorius)