杨栋林^1,2* , 罗慧蓉^2* , 陈治秀² , 廖文雪^1,2 , 方轶男² , 潘巍² , 侯丛林² , 吴荻² , 尚常花^1,2**

1 广西师范大学, 珍稀濒危动植物生态与环境保护教育部重点实验室, 桂林, 541004; 2 广西师范大学生命科学学院, 桂林, 541004
作者    通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2022 年, 第 20 卷, 第 28 篇   
收稿日期: 2020年11月01日    接受日期: 2020年11月13日    发表日期: 2023年03月03日

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为建立海菜花 ISSR-PCR 最优反应体系并筛选出适宜的 ISSR-PCR 引物，本研究应用 L₁₆(3⁴)正交设计试验和单因素实验，筛选 ISSR-PCR 反应体系中主要参数(引物, 2×Taq Master Mix, 模板 DNA)的最适浓度。结果表明，海菜花最适 ISSR-PCR 反应体系为引物 0.22 ng, 2×Taq Master Mix 1.5 U/25 μL、模板 DNA 24 ng。通过最优反应体系进行引物筛选，获得 19 条适宜海菜花扩增的 ISSR 引物，并利用 10 个地理居群的海菜花 DNA 对该体系进行验证。本研究对海菜花后续的遗传多样性、遗传图谱构建提供参考。

海菜花；正交试验；单因素；ISSR-PCR；引物筛选