郭晓亮¹ , 段媛媛¹ , 郭杰¹ , 游景茂¹ , 王澳炎² , 朱建波²

1 湖北省农业科学院中药材研究所, 湖北省农业科技创新中心中药材研究分中心, 恩施, 445000; 2 湖北民族学院生物科学与技术学院, 恩施, 445000
作者    通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2022 年, 第 20 卷, 第 27 篇   
收稿日期: 2020年10月23日    接受日期: 2020年11月08日    发表日期: 2022年04月28日

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本研究在均匀设计的基础上，采用单因素试验进行优化，探寻重齿毛当归进行ISSR-PCR扩增时各组分(即引物，2×Taq Master Mix，模板 DNA)的最佳用量，建立重齿毛当归ISSR-PCR扩增体系。筛选的最佳体系为：在20μL的体系中，2×Taq  Master Mix：11.4μL、DNA：9.04 ng、引物：0.325μmol/L。同时，还筛选出3条多态性较好、条带稳定的引物(UBC807、UBC810、UBC812)。在此基础上，进行ISSR-PCR扩增验证，结果表明该反应体系扩增效果较好，稳定性强，为重齿毛当归的种质资源评价、物种真伪鉴定等提供了一种新的分子标记。

重齿毛当归；ISSR-PCR；体系优化