孟醒¹ , 林昕¹ , 樊晓亮² , 钱庆¹ , 杨欣欣¹ , 黄海娇^1*

1东北林业大学,林木遗传育种国家重点实验室,哈尔滨, 150040; 2河北雾灵山国家级自然保护区管理中心,兴隆, 067300
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《分子植物育种》印刷版, 2021 年, 第 19 卷, 第 20 篇   
收稿日期: 2020年06月16日    接受日期: 2020年06月26日    发表日期: 2022年01月17日

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分析白桦BpERF1.1 基因不同组织部位以及低温胁迫后的表达模式，定位基因表达部位，并为获得转基因白桦做初步准备。通过实时荧光定量 PRC技术测定BpERF1.1 基因的相对表达量；利用基因枪法在洋葱表皮细胞瞬时表达 35S::BpERF1.1-GFP，激光共聚焦显微镜观察 GFP发光情况，获得BpERF1.1 基因表达产物的亚细胞定位信息；此外，利用双酶切法将BpERF1.1 基因连接到 pRokⅡ过表达载体，以及热激法转化到大肠杆菌感受态细胞中。BpERF1.1 基因在叶片中相对表达量最高；低温胁迫后的 24 h内，白桦BpERF1.1 基因持续上调表达；BpERF1.1 基因的表达产物定位在细胞核；pRokⅡ-BpERF1.1 植物过表达载体菌液 PCR的目的条带位置正确，测序结果 BLAST比对后与序列吻合。白桦BpERF1.1 基因主要表达部位在叶片，其可以响应低温逆境，且过表达载体 pRokⅡ-BpERF1.1 构建成功。

白桦；BpERF1.1；低温胁迫