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《分子植物育种》印刷版, 2021 年, 第 19 卷, 第 9 篇
收稿日期: 2020年04月20日 接受日期: 2020年04月24日 发表日期: 2021年07月22日
茉莉酸类物质(JAs)作为植物体内的内源生长调节物质,其包括了茉莉酸、茉莉酸甲酯、茉莉酸异亮氨酸及其相关衍生物质,对植物生长发育及抗性防御机制发挥着重要作用。丙二烯氧化物合成酶(allene oxide synthase, AOS)是植物体内茉莉酸生物合成途径的关键酶,影响着茉莉酸类物质的生物合成,进而调节植物的形态建成和防御反应。本研究基于甘蔗转录组数据库,成功克隆到甘蔗丙二烯氧化物合成酶ScAOS的 ORF全长序列,利用生物信息学方法了解该基因基本理化性质,并通过 qRT-PCR实验分析不同组织和不同胁迫下ScAOS 的表达水平差异。生物信息学结果表明,ScAOS 基因开放阅读框为 1 450 bp,编码 482个氨基酸,等电点为 6.30,不稳定系数为 28.4,平均疏水性值为 -0.12,预测ScAOS 基因编码的蛋白为稳定酸性亲水蛋白。二级结构三级结构预测其元件结构主要为α- 螺旋结构和无规则卷曲,该基因含有 P450超家族的PLN02648的结构域,属于细胞色素 P450基因家族中的 CYP74A蛋白家族成员。系统进化树结果显示,ScAOS 与高粱处在同一分支上,一致性高达 90.4%。qRT-PCR结果显示,ScAOS 在甘蔗根茎叶中均有表达,其中在茎中的表达量最高,在叶中的表达量最低。不同胁迫处理的表达差异结果显示,ScAOS 均能响应盐害、干旱、植物激素、病虫害等环境胁迫。其中在 NaCl、PEG、MeJA、病原菌和黏虫取食胁迫下表达水平均表现持续上升趋势,而在 ABA处理下则表现下调趋势。本研究成功克隆到甘蔗ScAOS 基因,并通过表达分析发现ScAOS 在植物抗性防御方面作用显著。