技术主题/Technology Feature

一种应用PCR缓冲液快速制备水稻DNA模板的方法  

田孟祥 , 张时龙 , 余本勋 , 何友勋 , 叶永印 , 李雪松
毕节市农业科学研究所, 毕节, 551700
作者    通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2015 年, 第 13 卷, 第 26 篇   doi: 10.13271/j.mpb.013.000438
收稿日期: 2014年04月04日    接受日期: 2014年08月25日    发表日期: 2014年10月10日
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摘要

本研究介绍一种应用PCR缓冲液快速制备水稻DNA模板的方法。操作方法如下:取少量水稻叶片,用剪刀剪碎后移至200 μL离心管或96孔PCR板中,在每个样品中加入50 μL 0.5倍的PCR扩增缓冲液,置于PCR基因扩增仪上在95℃条件下煮12 min,取出,无需离心,所得提取液直接作为DNA模板用于PCR扩增。结果表明,该方法所制备的水稻DNA模板在PCR扩增中稳定、准确,其效果与用常规SDS法提取的相当,且这种DNA模板可在短期内保存而不影响扩增效率。该方法具有成本低、操作快速简便等优点,适合推广应用。

关键词
PCR缓冲液;水稻;DNA模板;DNA制备

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《分子植物育种》印刷版
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