张竹君 , 任文娟 , 耿子雯 , 付鲁峰 , 李伟 , 姜新强^* , 刘庆华^*

青岛农业大学园林与林学院, 青岛, 266109
作者    通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2021 年, 第 19 卷, 第 20 篇   
收稿日期: 2020年03月05日    接受日期: 2020年03月11日    发表日期: 2021年05月11日

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月季(Rosa hybrida)是全球重要的观赏植物，其生长发育和生产质量严重受到干旱胁迫的制约。在已有月季转录组数据的基础上，干旱胁迫可以诱导干旱响应基因 RD22 (dehydration-responsive gene RD22)的表达。为了进一步探究 RhRD22 参与干旱胁迫的分子机制，本研究利用改良的 SMART (Switching Mechanism At 5' end of RNA Transcript)技术构建月季干旱胁迫酵母双杂交 cDNA 文库，并利用酵母双杂交技术筛选与RhRD22 相互作用的未知潜在蛋白。结果表明：成功构建了高质量月季酵母双杂交 cDNA 文库，该文库库容为 3×10⁶ cfu；插入 cDNA 片段的长度分布在 400~2 000 bp，平均长度大于 1 000 bp；重组率约为 100%。此外，利用重组诱饵蛋白 pGBKT7-RhRD22 在该文库中筛选了 7 个与 RhRD22 相互作用的蛋白，包括 RhEF-Ts、RhDRT100、RhGAPN、RhLDH、RhACLA-3、RhCALS3、RhEOL1。互作蛋白的 GO 注释分析表明，RhRD22 可能参与蛋白质多肽链的翻译和延伸、DNA 修复、代谢反应、乙烯生物合成、蛋白质泛素化、植物防御、应激反应等生物学过程。上述结果为进一步解析 RhRD22 参与干旱胁迫的分子机制提供了理论参考。

月季(Rosa hybrida)；RhRD22；cDNA 文库；酵母双杂交技术；互作蛋白