卿冬进¹ , 邓国富² , 戴高兴³ , 高利军¹ , 黄娟¹ , 高菊¹ , 潘英华³ , 周维永³ , 梁海福^3*

1 广西农业科学院, 广西作物遗传改良生物技术重点开放实验室, 南宁, 530007; 2 广西农业科学院, 南宁, 530007; 3 广西农业科学院水稻研究所, 南宁, 530007
作者    通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2020 年, 第 18 卷, 第 21 篇   
收稿日期: 2020年03月20日    接受日期: 2020年03月30日    发表日期: 2020年08月19日

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为研究水稻抗稻瘟病基因 Bsr-d1 在杂交水稻恢复系中的功能，我们利用 CRISPR/Cas9 定点基因编辑方法，设计 2 个敲除靶标位点，构建了 Bsr-d1 基因编辑载体，并通过农杆菌介导的方法转化水稻恢复系品种‘GH998’，成功获得了转基因植株，并在 T1 代筛选到 4 个无转基因成分的纯合突变株系。纯合突变株系有4 种突变类型，包括第 199 号碱基处缺失 17 个碱基、第 212 号碱基处缺失 4 个碱基、第 216 号碱基处插入1个碱基、第 216 号碱基处插入 2 个碱基突变类型。通过蛋白序列分析，发现纯合突变株系都存在移码现象导致氨基酸变化并提前终止翻译。本研究成功利用 CRISPR/Cas9 基因编辑方法敲除水稻恢复系‘GH998’中Bsr-d1 基因，获得无转基因成分的纯合突变株系，为进一步研究Bsr-d1 基因在杂交水稻上的功能提供了理论依据和品种资源。

水稻；稻瘟病；Bsr-d1；基因编辑技术； CRISPR/Cas9