龚秋涵 , 覃永华 , 刘学群 , 刘新琼 , 李开 , 王春台

中南民族大学生命科学学院, 武陵山区特色资源植物种质保护与利用湖北省重点实验室, 生物技术国家民委重点实验室, 武汉, 430074
作者    通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2020 年, 第 18 卷, 第 2 篇   
收稿日期: 2020年01月23日    接受日期: 2020年02月17日    发表日期: 2020年07月15日

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VDAC (Voltage-dependent anion channel)是位于线粒体外膜上参与细胞质和线粒体膜间物质及能量交换的主要通道，在细胞程序性死亡、能量代谢、物质运输以及信号转导过程中起着重要的作用。前期实验室在水稻基因组中鉴定出 8 个 OsVDAC 基因。为研究 OsVDAC6 的功能，本研究根据水稻 OsVDAC6 的ORF 序列设计引物，将相应编码区克隆至原核表达载体 pET-32a (+)中，通过 IPTG 诱导 OsVDAC6 融合蛋白表达，利用 Western Blot 检测目的蛋白。构建了 pM999-OsVDAC6-GFP 瞬时表达载体，转化水稻原生质体后用激光共聚焦显微镜观察荧光信号。结果表明 OsVDAC6 被成功克隆到 pET-32a (+)和 pM999-GFP 载体，0.5 mmoL/LIPTG 16℃诱导 8 h 可大量表达 49 kD 可溶性目的蛋白，并且 OsVDAC6 定位于线粒体。本试验结果为进一步研究 OsVDAC6 的功能提供了科学依据。

水稻；OsVDAC6；克隆；表达；亚细胞定位