王琪 , 张浩 , 雷秀娟 , 王英平^*

中国农业科学院特产研究所,长春, 130112
作者    通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2021 年, 第 19 卷, 第 19 篇   
收稿日期: 2020年01月02日    接受日期: 2021年02月11日    发表日期: 2021年06月02日

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基因编辑技术以细胞的自我修复机制为基础，通过非同源末端修复和同源重组途径达到基因编辑的目的。实验以pRGEB32载体为基本骨架，利用同源重组法构建以人参环阿屯醇合酶(CAS)为目的基因的CRISPR/Cas9载体，以期达到基因敲除的目的，从基因层面对皂苷合成进行调控;探究了头孢霉素对人参愈伤组织和EHA105农杆菌菌液生长的影响，并设置适宜的浓度梯度对共培养后的材料进行抑菌。实验结果表明：成功构建了CAS基因编辑的载体并将其导入农杆菌；愈伤组织长期生长在头孢霉素浓度大于300mg/L的培养基上生长会缓滞且褐变；共培养后的材料在500 mg/L的头孢抗性培养基上培养上3 d，300 mg/L的培养5d，转至100 mg/L的培养基并毎5~10d更换一次，材料能较好的生长以用于基因编辑的后续研究。

CRISPR/Cas9；人参；皂苷；农杆菌