杜旋¹ , 鲁博² , 刘娜^1*

1 上海市农业科学院设施园艺研究所, 上海市设施园艺技术重点实验室, 上海, 201403; 2 上海市农业科学院农业科技信息研究所, 上海, 201403
作者    通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2021 年, 第 19 卷, 第 27 篇   
收稿日期: 2019年12月16日    接受日期: 2019年12月20日    发表日期: 2021年09月15日

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为了获得适用于节瓜 SCoT-PCR 反应的反应体系以及适用于该体系的 SCoT 引物，首先利用正交实验的方法对节瓜 SCoT-PCR 反应体系的三因素(模板, 2伊sanTaq PCR mix 预混液, 引物)的工作浓度进行优化。然后利用优化的节瓜 SCoT-PCR 反应体系对 36 条 SCoT 引物进行筛选，首次筛选到应用于节瓜中的SCoT 引物，并对部分引物的退火温度进行优化。通过分析，确定了节瓜 SCoT-PCR 反应体系是 DNA 模板(25 ng/μL) 2.5 滋L、2伊SanTaq PCR mix 预混液 11 滋L、引物(10 μmol/L) 2 滋L，筛选到了 14 条适合在节瓜的ISSR-PCR 反应中应用的引物以及得到了它们的最适退火温度。与此同时，经验证该体系在节瓜应用具有良好的适用性、可靠性和稳定性。
 

节瓜； SCoT -PCR； 正交设计；引物筛选；退火温度