仪登霞^* , 仝宗永

中国农业科学院北京畜牧兽医研究所, 北京, 100193
作者    通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2021 年, 第 19 卷, 第 19 篇   
收稿日期: 2019年10月28日    接受日期: 2019年10月31日

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为建立农杆菌介导的紫花苜蓿高效遗传转化体系，以‘中苜 1 号’和‘保定苜蓿’为试验材料，选用离体叶片为外植体，采用农杆菌介导法将双元质粒载体 pCA-GR 导入紫花苜蓿，研究了不同浓度的两种抑菌剂(羧苄青霉素和特美汀)、Ag+、激素(KT 和 NAA)组合以及基因型对紫花苜蓿转化频率的影响。结果表明：当选择培养基中无其它添加时，两个基因型在转化频率上存在显著差异，‘保定苜蓿’的转化率达到 4.48%，显著高于‘中苜 1 号’苜蓿(2.97%)。当选择培养基中激素浓度组合为 2 mg/L KT+0.1 mg/L NAA，并含有 2.5 mg/L AgNO3 和 150 mg/L 特美汀时，‘保定苜蓿’的转化率最高，达到 10.42%；对卡那霉素抗性植株进行了 PCR、Southern blot 鉴定及除草剂抗性评价，表明除草剂抗性基因 GR79Ms 已成功导入受体紫花苜蓿基因组中并得到表达。本研究优化了紫花苜蓿的遗传转化体系，为转基因技术在紫花苜蓿育种中的应用提供了技术支持。
 

紫花苜蓿； 遗传转化； 体系优化； 分子检测；抗除草剂