邓治^1,2 , 胡燕玲^1,2 , 岳镒繁¹ , 代龙军¹ , 杨洪¹ , 李德军^*

1中国热带农业科学院橡胶研究所,农业农村部橡胶树生物学与遗传资源利用重点实验室,省部共建国家重点实验室培育基地 - 海南省热带作物栽培生理学重点实验室,海口, 571101; 2南京农业大学农学院,南京, 210095
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《分子植物育种》印刷版, 2020 年, 第 18 卷, 第 27 篇   
收稿日期: 2019年10月22日    接受日期: 2019年10月30日    发表日期: 2020年08月21日

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为进一步鉴定橡胶树翻译控制肿瘤蛋白(HbTCTP)与橡胶延伸因子 1 (HbREF1)互作的分子区域，构建 HbTCTP及其截短体的诱饵载体。本研究利用 RT-PCR技术从橡胶树胶乳中扩增出包含 HbTCTP不同结构域的片段，克隆到 pGBKT7表达载体，通过酶切、菌落 PCR和测序鉴定后，转化酵母 Y2HGold感受态细胞，检测诱饵蛋白是否具有自激活作用和毒性。结果显示，成功构建 6个包含 HbTCTP不同结构域的诱饵载体，且诱饵载体对酵母宿主细胞无毒性和无自主激活报告基因的功能。本研究结果为进一步筛选 HbTCTP与 HbREF1互作的分子区域及阐明HbTCTP 的功能提供科学依据。
 

橡胶树(Hevea brasiliensis)；HbTCTP,截短体；诱饵载体；酵母双杂交