彭媛媛 , 高展 , 艾克拜尔·毛拉 , 周龙^*

新疆农业大学林学与园艺学院, 乌鲁木齐, 830052
作者    通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2021 年, 第 19 卷, 第 23 篇   
收稿日期: 2019年09月27日    接受日期: 2019年09月30日    发表日期: 2021年03月14日

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为了建立适用于新疆主要葡萄品种的 ISSR-PCR 反应体系，本研究以新疆不同葡萄品种DNA为模板，采用均匀设计法，对影响ISSR-PCR体系的Mg²⁺、dNTPs、引物、Taq DNA聚合酶等进行了U₂₀(5⁴)和U₁₂(3⁴)两轮优化，建立了适用于新疆主要葡萄品种的ISSR-PCR反应体系。优化后的25 µL反应体系包含2.5 mmol/L Mg²⁺，2.0 mmol/L dNTPs，1.0 µmol/L引物，2.5 U Taq DNA聚合酶及1.0 µmol/L模板DNA，并在此基础上对退火温度及循环数进行了摸索。最后运用优化体系对24份不同葡萄品种的DNA进行扩增验证，结果获得的DNA条带清晰，多态性比较丰富。说明优化后的ISSR-PCR体系可用于新疆不同葡萄种间亲缘关系和遗传多样性等领域的研究。

葡萄；ISSR-PCR； 体系优化； 均匀设计