研究报告

CRISPR/Cas9介导靶向敲除拟南芥REVOLUTA 基因突变体的鉴定  

杨雪 , 孙雅佩 , 王政博 , 于茹恩 , 李雪萍 , 李红英*
河南科技大学林学院,洛阳, 471023
作者    通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2021 年, 第 19 卷, 第 21 篇   
收稿日期: 2019年09月27日    接受日期: 2019年09月30日    发表日期: 2021年03月17日
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摘要

CRISPR/Cas9系统可对植物的内源基因进行定点编辑,为获得基因缺失突变体提供了新的工具。HD-Zip家族成员 REVOLUTA (REV)是植物发育过程中的关键转录因子。本研究利用 CRISPR/Cas9基因编辑技术对拟南芥REV 进行特异性定点编辑,构建REV 基因编辑表达载体,并利用农杆菌介导的花序浸染法将其转入拟南芥。经潮霉素抗性平板筛选和 PCR扩增及测序鉴定,获得 7棵转基因株系。对转基因植株REV 基因的测序结果显示,有 3株均成功在靶点 1处产生编辑,且其中 1株在靶点 2处也成功编辑。该基因编辑突变体的获得为后续深入研究REV 基因在拟南芥形态发育过程中的作用提供了新的遗传材料。

关键词
CRISPR/Cas9;基因编辑;REVOLUTA;载体构建;突变体

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《分子植物育种》印刷版
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