内蒙古师范大学生命科学与技术学院, 呼和浩特, 010022
作者 通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2020 年, 第 18 卷, 第 20 篇
收稿日期: 2019年09月18日 接受日期: 2019年09月26日 发表日期: 2021年01月02日
作者 通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2020 年, 第 18 卷, 第 20 篇
收稿日期: 2019年09月18日 接受日期: 2019年09月26日 发表日期: 2021年01月02日
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摘要
本研究构建内生真菌酵母氨酸还原酶基因(saccharopine reductase, sac)功能互补载体 pBARGPESac,制备 sac 缺失突变株 M1 的原生质体,将 pBARGPE-Sac 载体转化至 M1 原生质体后再生,构建和筛选出互补株 C1。用 RT-PCR 技术检测转化子,并进行 DNA 测序,验证互补株。提取 C1、M1 及野生株 OW7.8 的苦马豆素(Swainsonine, SW),用 HPLC-MS 检测含量。结果显示:C1 中检测出 sac 和 hph 的表达,sac cDNA测序正确。C1 的 SW 水平高于 OW7.8 和 M1 (p<0.01),说明 sac 促进了该内生真菌中 SW 的合成。通过对 sac功能的研究,为明晰真菌 SW 合成途径提供基础数据。
关键词
内生真菌;酵母氨酸还原酶;互补株
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