刘春霞 , 桂花萍 , 文琴 , 刘宇博 , 高阳 , 张秀娟 , 崔瑞洁 , 许建平^*

先正达生物科技(中国)有限公司, 北京, 102206
作者    通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2020 年, 第 18 卷, 第 18 篇   
收稿日期: 2019年09月09日    接受日期: 2019年09月13日    发表日期: 2020年11月04日

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CRISPR/Cas9 系统是应用最为广泛的基因编辑系统，由核酸酶 Cas9 和一个单分子向导 RNA (single guide RNA, sgRNA)组成，共同介导了目标位点序列的切割，造成 DNA 双链断裂，从而激活细胞的内源修复途径，在修复过程中引入随机突变。目前 CRISPR/Cas9 技术已经在植物基因功能鉴定和作物遗传育种中得到广泛应用，番茄作为最重要的蔬菜作物之一，已经有很多关于成功编辑番茄内源基因的报道。但是，目前对番茄基因编辑系统优化的报道还比较少。本研究以 CRISPR/Cas9 为基础，通过改变 Cas9 和 sgRNA 的启动子，对番茄基因编辑系统进行优化，大大提高了基因编辑的效率。同时，在转化的过程中，对侵染后不同时期的外植体进行一段时间的高温处理，也可以明显提高基因编辑的效率。这些优化的方法也可以应用于其他作物基因编辑系统中。因此，本研究对提高不同作物的基因编辑效率提供了很好的范例。 

CRISPR/Cas9；启动子；番茄；基因编辑