吉林师范大学生命科学学院, 吉林省植物资源科学与绿色生产重点实验室, 四平, 136000
作者 通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2020 年, 第 18 卷, 第 21 篇
收稿日期: 2019年06月18日 接受日期: 2019年06月21日 发表日期: 2020年11月04日
作者 通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2020 年, 第 18 卷, 第 21 篇
收稿日期: 2019年06月18日 接受日期: 2019年06月21日 发表日期: 2020年11月04日
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摘要
病毒能够激活宿主的防御途径,诱导宿主大量基因表达。辅助成分 - 蛋白酶(helper-componentprotease, HC-Pro)是 RNA 病毒编码的基因沉默抑制子,关于 HC-Pro 诱导植物内源基因表达的分子机制并不十分清楚。本研究利用农杆菌介导的真空侵染法在拟南芥(Arabidopsis thaliana)小苗中瞬时表达了外源基因HC-Pro,并对影响基因表达效率的真空侵染条件进行了优化。结果表明农杆菌重悬液浓度 OD600=1.5,真空压力为 0.08 MPa,HC-Pro 基因表达效率最高(95%)。半定量 RT-PCR 检测结果表明在真空侵染 14 d 后,HC-Pro在拟南芥(Arabidopsis thaliana)中得到了瞬时表达。通过优化了农杆菌介导的真空侵染法,外源基因快速、高效在拟南芥中得到了表达。本研究结果为研究病毒抑制子 HC-Pro 的功能提供了帮助。
关键词
拟南芥(Arabidopsis thaliana);小苗真空侵染;农杆菌(Agrobacterium)
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