王慧娜¹ , 高建华³ , 张淑英² , 高庆荣¹ , 张卫东¹ , 李骞骞¹ , 姜晓丽¹

1 山东农业大学, 作物生物学国家重点实验室, 泰安, 271018;
2 德州市农业局种子管理处, 德州, 253016;
3 山东临沂烟草有限公司沂南分公司, 临沂, 276000
作者    通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2014 年, 第 12 卷, 第 22 篇   doi: 10.13271/j.mpb.012.000788
收稿日期: 2013年12月18日    接受日期: 2014年02月06日    发表日期: 2014年03月04日

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推荐引用：

Wang H.N., Gao J.H., Zhang S.Y., Gao Q.R., Zhang W.D., Li Q.Q., and Jiang X.L., 2014, Analysis and comparison of two-dimensional electrophoresis gel separation of wheat grain protein extracted by different methods, Fenzi Zhiwu Yuzhong (Molecular Plant Breeding), 12(4): 788-795 (王慧娜, 高建华, 张淑英, 高庆荣, 张卫东, 李骞骞, 姜晓丽, 2014, 不同方法提取的小麦籽粒蛋白双向电泳凝胶分离效果的分析比较, 分子植物育种, 12(4): 788-795)

为探索适于小麦籽粒蛋白质组学研究的样品制备最优方法，本研究以Rht10鲁麦15开花后第31天的籽粒为材料，采用4种不同蛋白质提取方法：TCA/丙酮法、尿素/硫脲法、酚提取法Ⅰ和酚提取法Ⅱ，对不同提取方法得到的蛋白量以及蛋白分离结果进行比较分析。结果显示：TCA/丙酮法和尿素/硫脲法获得的蛋白点较少，分别为484个和489个，蛋白质损失较大，蛋白质在碱性端(pH 7附近)堆积严重；酚提取方法Ⅰ得到的蛋白点709个，部分蛋白点弥散，碱性端蛋白轻微堆积；酚提取方法Ⅱ得到的蛋白点866个，蛋白点清晰，无碱性蛋白堆积。研究结果表明，在小麦籽粒蛋白质组的研究中，酚提取方法更为适合小麦籽粒蛋白的提取，同时方法Ⅱ优于方法。

小麦；籽粒蛋白；蛋白提取；双向电泳