李琼洁¹ , 朱芮² , 王小巧¹ , 朱永平³ , 赵兴富¹ , 肖靖译¹ , 贾茸¹ , 秦晓杰⁴ , 和凤美¹

1 云南农业大学园林园艺学院, 昆明, 650201;
2 福建农林大学艺术园林学院, 福州, 350000;
3 云南农业大学农学与生物技术学院, 昆明, 650201;
4 云南师范大学文理学院城市学院, 昆明, 650201
作者    通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2014 年, 第 12 卷, 第 18 篇   doi: 10.13271/j.mpb.012.000760
收稿日期: 2013年12月09日    接受日期: 2014年01月24日    发表日期: 2014年03月08日

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推荐引用：

Li Q.J., Zhu R., Wang X.Q., Zhu Y.P., Zhao X.F., Xiao J.Y., Jia R., Qin X.J., and He F.M., 2014, Clone transcription factor of DEF-like MADS family gene from Cymbidium lianpan and its transformation in Arabidopsis thaliana, Fenzi Zhiwu Yuzhong (Molecular Plant Breeding), 12(4): 760-764 (李琼洁, 朱芮, 王小巧, 朱永平, 赵兴富, 肖靖译, 贾茸, 秦晓杰, 和凤美, 2014, 莲瓣兰转录因子MADS家族DEF基因克隆及拟南芥遗传转化, 分子植物育种, 12(4): 760-764)

本研究以莲瓣兰‘玉兔彩蝶’花瓣为材料，根据GenBank中已经登录的春兰DEF基因序列(HM106982.1)设计引物，克隆DEF基因开放阅读框，构建表达载体，转化‘拟南芥’，并验证基因功能。研究结果表明：所扩增的DEF基因开放阅读框大小为669 bp，编码222个氨基酸，预测蛋白质分子质量为25.560 kD。该基因具有典型的植物MADS-box基因结构域，与春兰开放阅读框同源性达99%，与其它兰花同源性都在90%以上。将DEF基因构建到植物真核表达载体pCAMBIA2300中，利用农杆菌花序法转化拟南芥，经PCR分子鉴定，获得含DEF转基因拟南芥植株。

莲瓣兰；MADS； DEF；克隆；转化