黄祝兵 , 朱张生 , 张霜霖 , 宋佳丽 , 陈长明 , 雷建军

华南农业大学园艺学院, 农业部热带亚热带种质资源创制和利用重点实验室, 广州, 510642
作者    通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2020 年, 第 18 卷, 第 21 篇   
收稿日期: 2019年05月21日    接受日期: 1970年01月01日    发表日期: 2020年07月15日

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辣椒素类物质是辣椒属植物特有的一种次生代谢产物，特异地在辣椒果实胎座中合成，且具有明显的发育阶段特异性。辣椒素合成途径相关基因主要在辣椒花后 16 d 胎座发育至绿熟期转录，然而转录调控的精细分子机制尚不太清楚。用已知参与调控辣椒素生物合成的转录因子为诱饵，采用酵母双杂交技术从辣椒素合成阶段酵母 cDNA 文库中筛选与其互作的蛋白，有利于明确辣椒素生物合成的转录调控机制。因此，获得辣椒素合成阶段的高质量酵母 cDNA 文库是关键。本研究采用辣椒‘59’自交系花后 16 d (DPA)的 RNA作为模板，之后用 SMART cDNA/均一化 cDNA 文库技术(Switching mechanism at 5' end of the RNA transcript)与同源重组的方法将‘59’自交系的胎座 cDNA 文库转化酵母感受态 Y187。通过对收集的文库进行鉴定发现，滴度达到 3.63伊107 CFU/mL，插入片段大约 250~2 000 bp，文库满足酵母双杂交要求。辣椒胎座高质量cDNA 文库的构建为后续辣椒素生物合成的转录调控网络研究提供了基础。

辣椒素类物质；辣椒；酵母；胎座 cDNA 文库