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《分子植物育种》印刷版, 2014 年, 第 12 卷, 第 16 篇 doi: 10.13271/j.mpb.012.000748
收稿日期: 2013年11月19日 接受日期: 2014年01月26日 发表日期: 2014年04月21日
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Zhao R., Li L.L., Chen J.Q., and Sun J.N., 2014, Construction of expression vectors of the C class MADS-box gene AcAG related to flower development in onion and transformation to Arabidopsis thaliana, Fenzi Zhiwu Yuzhong (Molecular Plant Breeding), 12(4): 748-753 (赵瑞, 李丽林, 陈俊琴, 孙吉娜, 2014, 洋葱花发育C类MADS-box基因AcAG表达载体的构建及拟南芥转化, 分子植物育种, 12(4): 748-753)
为分析洋葱AcAG基因(GenBank ID: JX974431)的功能,本研究根据课题组前期获得的洋葱C类MADS-box基因AcAG的cDNA序列设计特异引物,利用RT-PCR技术从洋葱花瓣中分离到了AcAG基因的全长CDS序列,连接到植物载体pCAMBIA1304中,构建超表达载体pCAMBIA1304-AcAG(+)。采用冻融法将重组植物表达载体转入到农杆菌菌株LBA4404中,并利用花序侵染法对野生型拟南芥进行遗传转化。经RT-PCR和酶切鉴定,结果表明,AcAG过表达载体构建成功;转基因植株基因组PCR和RT-PCR分析结果表明,外源基因AcAG已经整合到拟南芥基因组中,并在转录水平上发生表达。