桂枝 , 高建明 , 卢树昌^*

天津农学院农学与资源环境学院, 天津, 300384
作者    通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2020 年, 第 18 卷, 第 14 篇   
收稿日期: 2019年04月26日    接受日期: 2019年05月03日    发表日期: 2020年08月23日

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Ⅲ型几丁质酶(chitinase Ⅲ, Chi Ⅲ)是植物重要的防卫蛋白之一，可阻止病原菌的侵入和发展，抑制特定病害的发生，在植物抵抗病原菌的过程中具有重要作用。为了分离苜蓿 Chi Ⅲ基因的基因组序列，进而分析其序列变异情况，本研究采用同源克隆法，从 16 个紫花苜蓿(Medicago sativa)品种的集群 DNA 中分离了 9 个属于 a 类的 Chi Ⅲ基因(Chi Ⅲ a)的部分基因组编码序列，分别与蒺藜苜蓿(Medicago truncatula)的 9 个Chi Ⅲ a 基因相对应，将其命名为 chit3-1-1、chit3-1-2、chit3-1-4、chit3-1-5、chit3-1-6、chit3-1-9、chit3-1-10、chit3-1-11 和 chit3-1-12。序列变异分析显示：chit3-1-1、chit3-1-2、chit3-1-5、chit3-1-9、chit3-1-10、chit3-1-11 和 chit3-1-12 这 7 个基因的单核苷酸多态性(SNP)位点间的平均距离分别为 28 bp、27 bp、648 bp、55 bp、64 bp、130 bp 和 131 bp，差异较大。表明 chit3-1-5 序列高度保守，chit3-1-11 和 chit3-1-12 比较保守，chit3-1-9 和 chit3-1-10 变异中等，而 chit3-1-1 和 chit3-1-2 的变异较大。从总体看，在苜蓿基因组中 Chi Ⅲ a基因的序列较为保守。本试验为进一步对 Chi Ⅲ基因进行关联分析等遗传学研究和 cDNA 全长克隆等分子生物学研究提供了良好的基础。
 

紫花苜蓿(Medicago sativa)；芋型几丁质酶；同源克隆；基因组序列分离