马秀花 , 唐楠 , 唐道城

青海大学,高原花卉研究中心,青海省园林植物与观赏园艺重点实验室,西宁, 810016
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《分子植物育种》印刷版, 2020 年, 第 18 卷, 第 21 篇   
收稿日期: 2019年04月25日    接受日期: 2019年05月27日    发表日期: 2020年06月22日

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为建立郁金香 SSR-PCR反应体系，本研究以 36个荷兰引进的郁金香栽培品种和 5个产于中国新 疆的野生种为试验材料，采用单因素试验和 L16(45 )正交设计相结合的方法，对影响郁金香 SSR-PCR 反应的 Mg2+ 浓度、 dNTPs浓度、 引物浓度、模板 DNA、 Taq 酶用量进行优化，建立最佳的 SSR-PCR 反应体系，并利用 3对引物在 41 份郁金香材料中验证反应体系的稳定性。结果表明：在 20 滋L的 PCR 反应体系中， 10伊PCR Buffer (Mg2+ free) 2 滋L、 Mg2+ 2.0 mmol/L、 dNTPs 0.75 mmol/L、引物 2.0 滋mol/L、模板 DNA 10 ng、 Taq 酶 0.15 U 为最优体系；通过正交试验确定 5个因子对 SSR-PCR体系的影响程度为：模板 DNA>Taq 酶>引物>Mg2+ > dNTPs。筛选出的 3对引物在 41份郁金香材料中均可扩增出目的条带，表明该体系的稳定性好。本研究建立 SSR-PCR反应体系，为郁金香 SSR标记的开发以及遗传多样性分析、品种指纹图谱构建、种质资源鉴定等方 面提供了帮助。

郁金香栽培品种；郁金香野生种；简单重复序列；单因素试验；正交试验