罗显麟¹ , 赵德刚³ , 赵懿琛^2*

1 贵州大学药学院, 山地植物资源保护与种质创新教育部重点实验室, 贵阳, 550025; 2 贵州大学茶学院, 山地植物资源保护与种质创新教育部重点实验室, 贵阳, 550025; 3 贵州省农业科学院农业部 DUS 中心贵阳分中心, 贵阳, 550006
作者    通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2020 年, 第 18 卷, 第 6 篇   
收稿日期: 2019年04月21日    接受日期: 2019年04月29日    发表日期: 2020年06月05日

这是一篇采用Creative Commons Attribution License进行授权的开放取阅论文。只要对本原作有恰当的引用，版权所有人允许和同意第三方无条件的使用与传播。

花烟草的花中特异地存在一种植物防御素 Nicotiala alata defensin 1 (NaD1)，对多种致病性真菌具有防御活性，在天然免疫系统中起着重要作用。该蛋白还对哺乳动物肿瘤细胞具有杀伤作用。本研究构建了原核表达载体 pET28a-NaD1，将其转化到 Rosetta 菌株中进行诱导表达并优化了诱导表达条件，发现在 25℃下，0.5 mmol/L IPTG 诱导表达过夜后，目的蛋白积累量达到最高，并主要以可溶性蛋白形式存在。利用 Ni 柱对 NaD1 重组蛋白进行亲和层析纯化，产物经 Western Blot 鉴定发现在 16.8 kD 处有特异性条带，与预期的 NaD1 重组蛋白大小一致。本研究结果为进一步研究 NaD1 蛋白的作用机制提供实验依据。
 

NaD1；防御素；原核表达；亲和纯化