张良波^1,2,3 , 王解香³ , 李培旺^2,3 , 陈景震^2,3 , 顾佳宁³ , 李昌珠^2,3 , 康向阳¹

1 北京林业大学, 北京, 100083;
2 湖南省林业科学院, 长沙, 410004;
3 湖南生物柴油工程技术研究中心, 长沙, 410004
作者    通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2014 年, 第 12 卷, 第 23 篇   doi: 10.13271/j.mpb.012.001005
收稿日期: 2013年10月18日    接受日期: 2014年01月12日    发表日期: 2014年08月24日

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推荐引用：

Zhang L.B., Wang J.X., Li P.W., Chen J.Z., Gu J.N., Li C.Z., and Kang X.Y., 2014, Optimization of SRAP-PCR Amplification System and Selection of Primers for Swida, Fenzi Zhiwu Yuzhong (Molecular Plant Breeding), 12(5): 1005-1010 (张良波, 王解香, 李培旺, 陈景震, 顾佳宁, 李昌珠, 康向阳, 2014, 梾木属SRAP-PCR反应体系的优化及引物筛选, 分子植物育种, 12(5): 1005-1010)

本研究利用Me2Em4正反向引物组合对影响梾木属SRAP-PCR反应体系的Mg²⁺、Taq聚合酶、dNTP和引物浓度4个因素进行L9(34)正交试验，采用正交设计直观分析及方差分析对影响SRAP反应的4个因素进行分析，并对模板DNA 浓度进行了单因素试验分析。结果表明，梾木属SRAP-PCR 20 μL反应体系的最佳组合为：Taq聚合酶2.0 U、Mg²⁺浓度1.5 mmol/L、dNTP浓度0.15 mmol/L、Primer浓度0.30 mmol/L、模板DNA浓度5.5 mg/L以及含有2 μL不含Mg²⁺的10倍稀释缓冲液。各因素对梾木SRAP-PCR反应的影响大小依次为：dNTP、Taq聚合酶、Mg²⁺和Primer。最后运用优化体系从100对SRAP引物组合中筛选出26个多态性SRAP标记，可用于梾木属不同种间亲缘关系、系统进化和遗传多样性等方面的研究。

梾木属；SRAP；正交设计；反应体系；引物筛选