研究报告

芒果 MiFTs 基因家族克隆及其酵母双杂诱饵载体的构建  

樊琰 * , 罗聪 * , 王逸涵 , 余海霞 , 莫啸 , 范志毅 , 何新华 **
广西大学农学院, 亚热带农业生物资源保护与利用国家重点实验室, 南宁, 530004
作者    通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2020 年, 第 18 卷, 第 15 篇   
收稿日期: 2019年03月18日    接受日期: 2019年03月25日    发表日期: 2020年05月28日
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摘要

成花诱导是开花植物生长发育过程中最为重要的一环,而开花整合因子 Flowering Locus T (FT)在这一过程中起非常重要的调控作用。目前,FT 基因调控芒果成花的作用机制尚不清楚。本研究以‘四季蜜芒’为材料,克隆验证了从转录组测序数据中挖掘获得的 3 FT 同源基因,命名为 MiFT1MiFT2 MiFT3。生物信息学分析显示,3 MiFTs 基因编码区长度分别为 588 bp540 bp 516 bp,分别编码氨基酸 196 个、180 个和 172 个,分子量分别为 48.97 kD44.71 kD 42.27 kD,等电点分别为 4.995.06 5.063 个基因均含有一个保守的 PEBP 结构域。将 MiFT1MiFT2 MiFT3 基因定向克隆到酵母表达载体 pGBKT7 上,通过菌落 PCR 和测序进行验证,并成功转化酵母菌株 Y2H Gold 感受态细胞。对诱饵质粒酵母菌进行自激活和毒性检测,发现 pGBKT7-MiFT1pGBKT7-MiFT2 pGBKT7-MiFT3 在酵母菌种均不具备自激活性和毒性。此酵母诱饵蛋白表达载体被成功构建,为后续蛋白互作筛选提供参考。
 

关键词
芒果(Mangifera indica L.);基因克隆;Flowering Locus T;载体构建

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《分子植物育种》印刷版
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