研究报告

水稻 OsNCED4 基因的克隆及功能初探  

周丽 1* , 李梦婷 1* , 朱骞1,2 , Sadia Nadir 3,4 , 李伟1 , 郭效琼1 , 冯天1 , 陈丽娟 1,2** , 李东宣 1,2**
1 云南农业大学, 稻作研究所, 昆明, 650201; 2 云南农业大学, 省部共建云南生物资源保护与利用国家重点实验室, 昆明, 650201; 3 本努科技大学化学系, 本努, 28100, 巴基斯坦; 4 中国科学院昆明植物研究所山地生态系统研究中心, 昆明, 650201
作者    通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2020 年, 第 18 卷, 第 2 篇   
收稿日期: 2019年03月14日    接受日期: 2019年03月21日    发表日期: 2020年05月22日
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摘要

脱落酸(abscisic acid, ABA)是一种抑制植物生长的植物激素,因能促使叶子脱落而得名,在植物逆胁迫中发挥关键作用。由 NCED 基因编码的 9- 顺 - 环氧类胡萝卜素双加氧酶(NCED),是 ABA 在高等植物中的关键酶。本研究已成功从水稻 Ilmibyeo (O. sativa L. ssp. japonica)基因组中克隆得到 OsNCED4,生物信息学分析表明,OsNCED4 基因位于水稻第 7 号染色体上,ORF 全长 1 749 bp,无内含子结构,编码 582 个氨基酸,具有 NCED 家族的 RPE65 保守结构;以该基因和其启动子序列构建组织表达载体 pOsNCED4::GUSpCaMV35S::OsNCED4:EGFP RNAi 干扰载体 pCaMV35S::OsNCED4:RNAi,用于基因表达和功能分析,并利用农杆菌介导的方法,成功获得了相应遗传载体的转基因植株;GUS 染色结果表明,该基因在叶片、叶耳、小穗等组织部位均有表达;RT-PCR 结果显示,OsNCED4 在水稻不同生育期的根、茎、叶、叶鞘和穗子中均有不同程度的表达,但表达量具有明显的差异;亚细胞定位结果显示,OsNCED4 基因编码的蛋白定位于细胞核;与野生型植株相比,RNAi 植株的花粉育性无明显差异,而结实率显著下降。该研究结果为进一步研究水稻 OsNCED4 基因表达的调控,以及为水稻生长发育上的功能研究提供了科学依据。


 

关键词
水稻(Oryza sativa L.);OsNCED4;基因克隆;生物信息学分析;基因表达

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《分子植物育种》印刷版
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