饶龙兵¹ , 杨汉波^1,2 , 郭洪英³ , 段红平² , 陈益泰¹

1 中国林科院亚热带林业研究所, 富阳, 311400;
2 云南农业大学农学与生物技术研究所, 昆明, 650201;
3 四川林业科学研究院, 成都, 610081
作者    通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2014 年, 第 12 卷, 第 19 篇   doi: 10.13271/j.mpb.012.000547
收稿日期: 2013年09月09日    接受日期: 2014年01月23日    发表日期: 2014年05月11日

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推荐引用：

Rao L.B., Yang H.B., Guo H.Y., Duan H.P., and Chen Y.T., 2014, Establishment of the Optimized AFLP Analysis System for Alnus, Fenzi Zhiwu Yuzhong (Molecular Plant Breeding), 12(3): 547-553 (饶龙兵, 杨汉波, 郭洪英, 段红平, 陈益泰, 2014, 桤木属植物AFLP 反应体系的建立与优化, 12(3):  547-553)

为了建立桤木属植物AFLP体系，筛选扩增条带丰富的引物，本研究以欧洲桤木（A.glutinsoa）为材料，对AFLP反应过程中的关键因素(DNA质量和浓度，酶切，反应体系等)进行了研究。结果表明：欲扩增稀释产物3.0 μL，酶切时间以5 h，连接16 h，连接产物稀释10 倍用于预扩增，预扩增产物稀释20倍为宜。确定桤木AFLP-PCR 20 μL的反应体系：模板DNA 300 ng，10×Taq DNA 聚合酶Buffer (含Mg²⁺) 2.0 μL，dNTPs 0.3  μL，引物1.0 μL，Taq DNA 聚合酶0.6 U，加ddH₂O 至20 μL，并利用建立的体系筛选出7 对扩增条带多、条带清晰、多态性好的引物。本研究建立了适用于桤木属植物的AFLP 反应体系，并筛选出适合桤木属植物的引物，为今后利用AFLP 标记技术进行桤木属遗传多样性分析提供了一定的实验依据。

AFLP；欧洲桤木； 多态性