梁子健 , 朱鹏翔 , 纪兆林 , 陈孝仁 , 朱峰

扬州大学园艺与植物保护学院, 扬州, 225009
作者    通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2020 年, 第 18 卷, 第 31 篇   
收稿日期: 2018年11月20日    接受日期: 2018年12月27日    发表日期: 2020年04月29日

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非特异性脂质转移蛋白(non-specific lipid transfer proteins, nsLTPs)是植物中大量存在的小分子脂类结合蛋白，具有多种生物学功能。为研究 nsLTPs 在调控植物应答生物与非生物胁迫的反应中起的作用，本研究以本生烟(Nicotiana benthamiana)为材料，成功克隆非特异脂质转移蛋白 NbLTP1 全长基因，其开放阅读框序列为 360 bp，编码 119 个氨基酸，分子重量为 12.44 kD，为疏水性蛋白，等电点为 7.45。对 NbLTP1 蛋白质三级结构进行了预测和分析，并进一步构建了烟草脆裂病毒(Tobacco rattle virus, TRV)介导的病毒诱导的基因沉默载体 TRV:NbLTP1。荧光定量 PCR 结果表明通过 VIGS 可以显著抑制 NbLTP1 基因的表达。此外还通过 In-Fusion 克隆技术快速成功构建了 pCAMBIA1305-NbLTP1-3*HA 过量表达载体。本研究为下一步遗传转化、后续研究 NbLTP1 调控植物防御生物与非生物胁迫的分子机理、培育新种质提供理论依据。

本生烟(Nicotiana benthamiana)；非特异性脂质转移蛋白；病毒诱导的基因沉默；基因克隆；过量表达