豆玉娟 , 曹飞 , 马跃 , 李贺 , 刘月学 , 张志宏

沈阳农业大学园艺学院, 沈阳, 110866
作者    通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2014 年, 第 12 卷, 第 6 篇   doi: 10.13271/j.mpb.012.000456
收稿日期: 2013年06月26日    接受日期: 2014年03月05日    发表日期: 2014年04月02日

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推荐引用：

Dou Y.J., Cao F., Ma Y. Li H., Liu Y.X., and Zhang Z.H., 2014, Cloning of bHLH78 Gene Expressed Specifically in Fruits of Cultivated Strawberry and Construction of Overexpression Vector, Fenzi Zhiwu Yuzhong (Molecular Plant Breeding), 12(3): 456-465 (曹金良, 陈志伟, 林德塨, 吴为人, 谢小芳, 2014, 栽培草莓果实中特异表达的bHLH78 基因的克隆及过量表达载体构建, 12(3): 456-465)

根据二倍体野生森林草莓(Fragaria vesca)预测的bHLH78-like 基因序列设计特异性引物，利用RT-PCR 技术从八倍体栽培凤梨草莓(Fragaria伊ananassa)品种‘幸香’果实中克隆出FabHLH78 基因全长CDS。测序和分析结果表明，FabHLH78 基因的CDS 全长1 653 bp，编码550 个氨基酸残基，在线软件Compute pI/Mw 分析编码的蛋白质理论分子量约为59.6 kD、等电点(pI) 6.17，经软件DNAMAN 分析，核酸序列和氨基酸序列与二倍体草莓FvbHLH78-like 基因的一致性分别为98.31%和96.55%。利用半定量PCR检测FabHLH78 基因在草莓根、匍匐茎、叶、果实中的表达情况，发现其只在果实中特异表达；实时定量RT-PCR 结果显示随着果实发育FabHLH78 基因表达量逐渐增加。FabHLH78 全长CDS 被整合到植物表达载体pRI101-AN 上，构建出FabHLH78 基因的过量表达载体pRI101-bHLH78，为进一步验证FabHLH78 基因的功能奠定了基础。