陈亚新^* , 陈洁^* , 张月婷 , 杨璐 , 帅艳玲 , 彭晓珏

南昌大学生命科学学院, 江西省分子生物学与基因工程重点实验室, 南昌, 330031
作者    通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2019 年, 第 17 卷, 第 14 篇   
收稿日期: 2018年10月08日    接受日期: 2018年11月21日    发表日期: 2019年10月17日

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分子伴侣是在生物大分子的折叠、组装、转运及降解等过程中起协助作用，但自身并不发生任何变化的一大类广泛存在于生物体内的蛋白质分子。小热激蛋白(small heat shock protein, sHSP)是一类在抵抗逆境胁迫过程中扮演重要角色的蛋白质分子。本研究在 OssHSP 基因外显子区域设计了带有 PAM 序列的靶位点，利用 PCR 扩增获得 OssHSP 基因 sgRNA 表达盒，成功构建了 CRISPR/Cas9 敲除载体；利用根癌农杆菌介导的遗传转化获得 2 个 OssHSP 基因(Os01g0136100 和 Os02g0782500)的 T0 代 CRISPR 转基因植株；通过PCR 扩增和测序确定突变类型，获得 48 株不同突变类型的 OssHSP1 突变单株，6 株不同突变类型的OssHSP2 突变单株，6 株不同突变类型的 OssHSP1 和 OssHSP2 双突变单株，为进一步开展 OssHSP 基因功能的研究提供了材料

分子伴侣；OssHSP 家族基因；CRISPR/Cas9 技术