研究报告

百合谷胱甘肽-S-转移酶基因(LotGSTL)克隆及原核表达  

边晓天 1 , 邵杨1 , 张克中 1,2,3* , 崔金腾1,2,3 , 葛伟1,2 , 贾月慧4
1 北京农学院园林学院, 北京, 102206; 2 北京农学院, 城乡生态环境北京实验室, 北京, 102206; 3 北京乡村景观规划设计工程技术研究中心, 北京, 102206; 4 北京农学院植物科技学院, 北京, 102206
作者    通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2019 年, 第 17 卷, 第 5 篇   
收稿日期: 2018年09月03日    接受日期: 2018年09月11日    发表日期: 2020年02月16日
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摘要

采用 RACE 技术,克隆 OT 百合‘Robina(Lilium OT hybrids 'Robina')中编码谷胱甘肽转移酶基因LotGSTL,对其进行了生物信息学分析,研究了该基因在不同组织中的表达特性,并对该基因进行原核表达。结果显示:该基因全长 800 bpORF 717 bp,编码 238 个氨基酸。氨基酸序列比对及系统分析表明,该基因与拟南芥的两个 Lambda GST 基因聚为一类,初步确定为百合 Lambda GST 基因,命名为 LotGSTL。生物信息学分析表明,LotGSTL 蛋白含有典型的 GST 蛋白保守结构域,为亲水性蛋白,无跨膜结构,分子量为27 278.2 Da,理论等电点为 5.2,分子式为 C1257H1933N309O361S4,可能存在 14 个磷酸化位点。建立了稳定的 LotGSTL1 原核表达体系,原核表达的 LotGSTL1 蛋白大约为 27 kD,与预测的蛋白相对分子量一致。分析了LotGSTL 基因在不同器官中的表达模式,发现其在花、叶、根、鳞茎中表达量均较高,而茎中表达量较低,相对表达量依次为:花>>>鳞茎>茎。该研究将为解析百合 LotGSTL 基因的抗逆功能提供帮助,对于未来百合抗逆分子育种的研究有所帮助。

关键词
百合(Lilium spp.);谷胱甘肽 -S- 转移酶基因克隆; 原核表达

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《分子植物育种》印刷版
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