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《分子植物育种》印刷版, 2019 年, 第 17 卷, 第 14 篇
收稿日期: 2018年08月17日 接受日期: 2018年09月19日 发表日期: 2019年08月15日
本研究结合花叶唐竹(Sinobambusa tootsik f. luteoloalbostriata)不同叶色表型的转录组数据,利用荧光定量 PCR 技术筛选适合于花叶唐竹叶片的内参基因。参考传统内参基因并结合转录组数据,筛选出 7 个候选内参基因,分别是 Elongation factor 1-alpha (EF1a)、Glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase (GAPDH)、Ubiquitin extension protein (UBI)、S-adenosylmethionine decarboxylase (SAM)、TIP41-like family protein (TIP41)、Nucleotide tract-binding protein (NTB)和 ABA Hypersensitive 1 (ABH1)。应用 qRT-PCR 技术对这 7 个候选内参基因在花叶唐竹 4 种叶色表型中的表达情况进行检测,并利用 BestKeeper、GeNorm 以及 NormFinder 3 种软件计算并分析了 7 个候选内参基因在花叶唐竹不同叶色表型中的表达稳定性。结果表明:GAPDH、EF1a和 SAM 3 个基因的表达最为稳定、ABH1 的稳定性最差;分别以 GAPDH、EF1a 和 SAM 3 个基因为内参,分析了 PsbA 基因在花叶唐竹 4 种叶色表型中的相对表达量,结果显示趋势一致,从而验证了 GAPDH、EF1a 和SAM 的表达稳定性,这 3 个基因均可作为花叶唐竹 qRT-PCR 技术验证表达量的内参基因。该研究为花叶唐竹叶色表型差异的分子机理研究提供了科学依据。