北京林业大学,草坪研究所,北京, 100083
作者 通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2019 年, 第 17 卷, 第 15 篇
收稿日期: 2018年07月26日 接受日期: 2018年08月27日 发表日期: 2019年08月04日
作者 通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2019 年, 第 17 卷, 第 15 篇
收稿日期: 2018年07月26日 接受日期: 2018年08月27日 发表日期: 2019年08月04日
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摘要
大叶落地生根(Kalanchoe daigremontiana)为景天科多年生肉质草本植物,是研究无性繁殖的模式植物。 SOC1 (Suppressor of overexpression of constans 1)基因是植物成花过程中 MADS-box基因家族中的关键转录因子。为深入研究大叶落地生根KdSOC1基因的功能,于大叶落地生根中克隆 KdSOC1 基因,进行生物信息学分析,构建酵母双杂交诱饵表达载体 pGBKT7-KdSOC1,并采用 LiAc法将重组质粒 pGBKT7-KdSOC1转化至Y2HGold酵母菌株中,通过营养缺陷型培养基培养进行自激活检测。结果表明,成功克隆了 KdSOC1基因,该基因开放阅读框共有 684 bp。生物信息学分析结果显示, KdSOC1蛋白共有 227个氨基酸残基, 分子量为 25.88 kD,大叶落地生根SOC1蛋白与牡丹的亲缘关系最为接近。双杂交诱饵表达载体 pGBKT7-Kd-SOC1构建成功,并在酵母细胞中正常表达,表达产物对报告基因无自激活作用。本研究为筛选大叶落地生
根中与其互作的蛋白及后续实验提供了帮助。
关键词
大叶落地生根;KdSOC1基因;酵母双杂交;诱饵表达载体;自激活检测
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